■ 產(chǎn)品簡介
零背景ZT4-Blunt克隆試劑盒是專門對平滑末端DNA片段或PCR擴增產(chǎn)物進行高效克隆的一種陽性篩選系統(tǒng)。該克隆載體包含一個致死基因,當(dāng)目的DNA片段插入克隆位點時,該致死基因被破壞,故僅帶插入目的片段的克隆才能生長形成白色菌落,無需加入IPTG及X-Gal進行藍白斑篩選;克隆陽性率超過95%。
■ 產(chǎn)品亮點
·可5min快速連接,且克隆效率超過95%
·無需IPTG及X-Gal進行藍白斑篩選
·PCR擴增產(chǎn)物無需磷酸化
·酶切產(chǎn)物無需去磷酸化
·專用于平滑末端DNA片段或PCR擴增產(chǎn)物
·特別適合Pfu、KOD等系列產(chǎn)物的克隆
1.制備片段

| ★平端片段(Pfu、KOD等擴增產(chǎn)物) |
★片段濃度最低可至5ng/μL |

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2.與載體混合加入連接酶

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★實現(xiàn)5min快連
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★最長可連接10kb片段(即使5kb片段,也已超過95%的陽性率)
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★載體穩(wěn)定性極高,反復(fù)凍融影響極低 |

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3.轉(zhuǎn)化

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★采用先進的自殺基因篩選技術(shù)無需繁瑣藍白斑篩選,陽性克隆率接近100%
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■ 菌落PCR

■ 儲存
-20℃下至少保存1年。
■ ZT4-Blunt載體測序引物序列
Forward Sequencing Primer,20-mer:5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’
Reverse Sequencing Primer,24-mer:5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’
■ ZT4-Blunt載體圖譜

■ ZT4-Blunt載體多克隆位點序列
